期刊简介

《中华流行病学杂志》前身为1956年创刊的《流行病学杂志》,为流行病学及其相关学科的高级专业学术期刊。以从事预防医学、基础医学、临床医学及流行病 学科研与教学的工作者为读者对象。《中华流行病学杂志》按照理论与实际应用相结合的原则,集中报道国内流行病学领域内重要的科研成果,重视现场流行病学调 查和监测,展现与流行病学相关的实验室科研报告,报道临床流行病学研究,综合反映疾病预防控制工作中的热点和重点问题。

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  • 杂志名称:中华流行病学杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0254-6450
  • 国内刊号:11-2338/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:连续多年被评为百种中国杰出学术期刊、中国精品科技期刊、中国最具国际影响力学术期刊等。期刊收录:万方收录(中), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
中华流行病学杂志2008年第03期

基于淋病奈瑟菌外膜蛋白pIA-pIB融合基因重组产物酶联免疫吸附试验的建立和应用

孙爱华;范兴丽;严杰

关键词:淋病奈瑟菌, 融合基因, 酶联免疫吸附试验
摘要:目的 克隆淋病奈瑟菌外膜蛋白pIA、pIB基因并构建pIA-pIB融合基因及其原核表达系统以及建立基于rPIA-PIB的酶联免疫吸附试验(ELISA).方法 采用连接引物PCR构建pIA-pIB融合基因,按常规分子生物学方法构建其原核表达系统.采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和BioRad凝胶图像分析系统检测目的重组蛋白rPIA-PIB表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯rPIA-PIB.以rPIA-PIB为包被抗原建立检测淋病患者血清标本中rPIA和/或rPIB特异性IgG的ELISA,以rPIA-PIB抗血清为一抗建立检测淋病患者脓液标本中rPIA和/或rPIB的ELISA,实验中以rPIA、rPIB及其抗血清相关ELISA为对照.结果 pIA-pIB融合基因与原始核苷酸和氨基酸序列相似性均为100%.rPIA-PIB表达量为细菌总蛋白的29.8%,其提纯物SDS-PAGE后显示单一条带.rPIA-PIB-IgG-ELISA检测119例淋病患者血清标本的阳性率(98.3%)明显高于rPIA-IgG-ELISA(30.3%)或rPIB-IgG-ELISA(66.4%)(P<0.01).rPIA-PIB-ELISA检测119例淋病患者脓液标本的阳性率(91.6%)也明显高于rPIA-IgG-ELISA(27.7%)或rPIB-IgG-ELISA(62.2%)(P<0.01).结论 成功构建淋病奈瑟菌pIA-pIB融合基因及其原核表达系统;较之单一的rPIA或rPIB,rPIA-PIB作为淋病相关检测试剂盒抗原具有明显的优越性.