期刊简介
《中华流行病学杂志》前身为1956年创刊的《流行病学杂志》，为流行病学及其相关学科的高级专业学术期刊。以从事预防医学、基础医学、临床医学及流行病 学科研与教学的工作者为读者对象。《中华流行病学杂志》按照理论与实际应用相结合的原则，集中报道国内流行病学领域内重要的科研成果，重视现场流行病学调 查和监测，展现与流行病学相关的实验室科研报告，报道临床流行病学研究，综合反映疾病预防控制工作中的热点和重点问题。
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首页>中华流行病学杂志
- 杂志名称：中华流行病学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0254-6450
- 国内刊号：11-2338/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：连续多年被评为百种中国杰出学术期刊、中国精品科技期刊、中国最具国际影响力学术期刊等。期刊收录：万方收录(中), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
分子生物学方法在儿童流行性感冒监测中的应用
朱汝南；钱渊；王芳；刘成贵
关键词：流感病毒, 多重逆转录-聚合酶链反应, 巢式-聚合酶链反应, 序列分析
摘要：目的建立一种能够快速、特异、有效地直接从临床标本中检测流行性感冒(流感)病毒并进行病毒型和亚型鉴别的方法,同时了解近年来北京地区A3型流感病毒血凝素重链(HA1)区基因的变异特点.方法根据编码A、B型流感病毒膜蛋白M基因的核苷酸序列设计两对引物,用于同一逆转录(RT)-PCR反应中(多重RT-PCR),根据A、B型毒株扩增产物的大小(分别为506 bp和261 bp)鉴别A、B型流感病毒.另根据编码A1和A3型流感病毒糖蛋白HA基因的核苷酸序列设计两对引物,与B型M基因引物用于同一RT-PCR反应中,可区分A1、A3或B型流感病毒(扩增产物分别为944 bp、1 072 bp和261 bp).为提高检测临床标本的敏感性,针对A1和A3型病毒HA基因和B型病毒M基因又设计了3对引物作为外侧引物,进行巢式-PCR反应.根据第二次PCR的扩增产物在1.2%的琼脂糖凝胶电泳中的大小即可确定型别.经PCR扩增1996～2002年间分离的北京地区A3型流感病毒株HA1区基因,测序并进行序列分析.结果用上述多重RT-PCR鉴定流感病毒分离株156株,与血凝抑制试验阳性符合率为100%.用多重巢式-PCR检测92份已经病毒分离确定为流感的儿科临床呼吸道标本,与病毒分离和血凝抑制试验阳性符合率分别为76.9%(A1型)、57.1%(A3型)、86.5%(B型).对5株1996～2002年间A3型分离株HA1区基因序列分析结果显示,不同年份的分离株HA1区基因具有较高的核苷酸和氨基酸同源性,而且年份越近的毒株之间同源性越高.结论多重RT-PCR和巢式-PCR可同时检测不同型别的流感病毒,并可直接对临床标本进行检测,为流感监测提供更加快速的新方法.北京地区A3型流感病毒分离株HA1区基因持续不断地发生点突变,糖基化位点不断增多,可能是导致其抗原漂移的原因.
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